Golf Kauai Hawaii - Kauai Golf Courses - Kauai Golf Packages

aucun

Le plasma a été la matrice principale pour la mesure de la concentration systémique des composés utilisés dans l’évaluation et l’évaluation de la pharmacocinétique (PK) et de la pharmacodynamique (PD), à la fois l’efficacité et la sécurité, dans la découverte et le développement de médicaments. Une alternative, les taches de sang séché (DBS), a récemment gagné en popularité, avec quelques avantages pratiques distincts mais aussi des problèmes techniques (1), bien que la méthode ait été utilisée en pédiatrie dès 1963 (6). Des solutions à plusieurs de ces problèmes analytiques et méthodologiques ont été abordées (7 – 14). Cependant, il ne semble pas y avoir de commentaire associé sur le PK et les questions connexes soulevées par DBS. Cette communication est destinée à aider ceux qui envisagent d’utiliser le DBS comme une approche pour mesurer la concentration systémique de médicaments. La plupart des commentaires s’appliquent également aux métabolites. Les questions soulevées par DBS sont, en principe, les mêmes que celles soulevées par l’utilisation de sang total, car les estimations de la concentration de DBS devraient être les mêmes que celles des échantillons de sang originaux. ils sont préparés. Historiquement, les principaux arguments en faveur du plasma sur le sang ont été la plus grande facilité de stockage et d’analyse chimique et l’homogénéité du plasma par rapport au sang coagulé.En ce qui concerne la pharmacocinétique, le principal argument en faveur du sang total repose principalement sur des considérations physiologiques. A savoir, contrairement à la clairance plasmatique, il existe une limite supérieure à la clairance sanguine des organes; c’est le flux sanguin des organes (avec un taux d’extraction approchant la limite supérieure de 1). La clairance sanguine des organes devient alors limitée par la vitesse de perfusion et plus sensible aux changements dans le flux sanguin qu’à d’autres processus, tels que l’activité enzymatique et la liaison aux protéines plasmatiques (15). En outre, dans la situation où l’élimination du sang dépasse le débit sanguin hépatique, elle fournit une indication quant à l’implication significative d’organes ou de tissus supplémentaires dans l’élimination d’un composé. De plus, la connaissance du rapport d’extraction hépatique (donné par le rapport entre la clairance sanguine hépatique et le débit sanguin hépatique) permet d’estimer la biodisponibilité orale maximale d’un composé (16). Cependant, parce que le plasma plutôt que le sang est couramment mesuré, pour arriver aux conclusions ci-dessus, il devient nécessaire de convertir la clairance plasmatique en élimination sanguine en utilisant le rapport de concentration sang-plasma. Ces dernières années, il est devenu reconnu que le rapport sang-plasma, couplé à la liaison aux protéines plasmatiques, contribue également à la prédiction de la distribution tissulaire de bases modérément fortes (17) .Essentiellement, tous les événements se produisant dans le corps, qu’ils soient liés à PK ou PD, sont entraînés par une concentration non liée. On peut donc soutenir que nous devrions mesurer directement la concentration non liée plutôt que la concentration totale. Cependant, il existe de nombreux problèmes techniques entourant la détermination de la concentration non liée qui ont sévèrement limité cette mesure dans la pratique. La microdialyse offre un moyen d’aller de l’avant, bien que cette technique ait ses propres problèmes techniques susceptibles de limiter son utilisation étendue ou routinière. Ainsi, la mesure totale est là pour rester, au moins pour l’avenir prévisible. La question fondamentale est la suivante: Dans quelles circonstances la mesure totale du médicament dans le sang total (lecture DBS) ou le plasma est-elle un substitut adéquat pour le composé non lié? La question corollaire est la suivante: Lorsque le sang ou le plasma cesse d’être un substitut approprié, quelles mesures doivent être prises pour apporter la correction nécessaire? Pour explorer ces questions, il est utile de comprendre les relations entre le plasma total non lié et le sang total. concentrations, affichées schématiquement sur la figure   1. Ici, on voit que la liaison peut être à des constituants à la fois dans le plasma et sur ou dans les cellules sanguines, tandis que la membrane des cellules sanguines peut agir comme une barrière ralentissant ou entravant totalement le mouvement du composé dans les cellules sanguines. À l’équilibre, en supposant qu’il n’y ait pas de dégradation dans le sang, les relations sont les suivantes:

12 où Cu, C et Cb sont respectivement le plasma total non lié et la concentration sanguine totale, fu est la fraction non liée dans le plasma, H est l’hématocrite et ρ est le rapport de concentration plasmatique de globules sanguins à non-lié, une mesure de l’affinité que les cellules sanguines ont pour le composé. En pharmacocinétique, le rapport Cu / Cb est communément noté par fub, bien qu’il ne soit clairement pas la fraction de médicament non lié dans le sang, car aucune hypothèse n’est faite dans l’équation pour savoir si la drogue pénètre dans les globules sanguins à distribuer dans le sang. espace aqueux intracellulaire. A partir de ces relations, on voit que la concentration plasmatique est proportionnelle à la concentration non liée lorsque fu est constante et que la concentration sanguine est proportionnelle à la concentration non liée, en plus de fu, H et ρ besoin d’être constant. Lorsque, comme c’est souvent le cas, ces conditions se conservent raisonnablement bien, alors la concentration plasmatique ou sanguine peut également être utilisée pour refléter la concentration non liée. Le problème survient lorsqu’une ou plusieurs de ces conditions ne sont pas remplies.

Fig.   1Schématique des événements survenant dans le sang. L’étendue et la cinétique de la distribution dans les cellules dépend de la perméabilité de la membrane cellulaire et de l’affinité du composé pour les constituants du plasma et des cellules sanguines. Certains médicaments, tels que la caféine et les antibiotiques aminoglycosides, ne se lient pas aux protéines plasmatiques (fu   =   1); pour de tels médicaments, C   =   Cu, et sans doute, le plasma est la matrice à mesurer (bien que, comme soutenu par la suite, le sang est aussi utile que le plasma pour ces médicaments). Cependant, la majorité des médicaments se lient aux protéines plasmatiques. Ensuite, les changements possibles de fu doivent être gardés à l’esprit. La valeur de fu peut augmenter en raison de la saturation des sites de liaison disponibles (lorsque la concentration molaire du composé, ou d’un déplaceur, dans le plasma s’approche de la concentration molaire des sites de liaison). Il peut également varier sensiblement avec l’âge, la maladie, comme les maladies rénales et hépatiques, et dans diverses autres conditions, telles que la grossesse et les brûlures excessives (18). Dans ces circonstances, pour fournir une interprétation correcte des événements sous-jacents, il faut mesurer soit la concentration de médicament non lié directement ou déterminer fu (ou un ratio de valeurs de fu, de contrôle et de condition altérée). En outre, la liaison diffère souvent entre les espèces animales et l’homme, et là encore, lorsqu’on entreprend une évaluation de la sécurité basée sur une exposition relative non liée entre espèces, il convient de corriger ces différences de liaison.Maintenant considérer le sang où les paramètres additionnels H et &#x003c1 ; sont des problèmes potentiels. Normalement, l’hématocrite est relativement constant et non préoccupant, bien qu’il soit inférieur dans certaines conditions telles que l’anémie, où l’hématocrite peut tomber de sa valeur habituelle de 0,45 à 0,2, ce qui doit être pris en compte dans l’interprétation de mesures de sang. Certains composés, en particulier hydrophiles, tels que de nombreux antibiotiques, sont trop polaires et trop grands pour pénétrer dans les cellules sanguines, et pour ces composés, les cellules sanguines agissent simplement pour diluer le plasma, le Cb étant donné par

D’où l’on voit que la situation est essentiellement la même que pour le plasma. Fréquemment, de tels composés, par exemple, les aminoglycosides, ne se lient pas non plus aux protéines plasmatiques (fu   =   1), ou le font mal, de sorte que Cb se rapproche de (1 − H) &#x022c5 Cu, auquel cas le sang fournit une mesure raisonnable de médicament non lié. Certains autres médicaments, tels que la caféine et l’éthanol, pénètrent librement dans les cellules sanguines, mais ne se lient pas aux constituants cellulaires ou aux protéines plasmatiques. Pour ces médicaments, Cb est approximativement égal à Cu, et encore une fois, il n’y a aucun risque d’interprétation erronée des valeurs sanguines. Cependant, ce sont des exceptions. La plupart des médicaments ne pénètrent pas seulement dans les cellules sanguines, mais s’y fixent aussi de façon à ce que ρ peut être un problème critique. Les principales cellules sanguines d’intérêt sont les érythrocytes; les médicaments peuvent également avoir une affinité élevée pour les globules blancs et les plaquettes, mais les volumes fractionnaires de ceux-ci sont si faibles qu’ils n’affectent pas en général la valeur globale de &#x003c1 ;. Les médicaments varient dans leur affinité pour les constituants sur ou dans les érythrocytes. Les médicaments acides ont tendance à avoir une faible affinité pour les érythrocytes, tandis que les bases modérément fortes (pKa > 7), principalement ionisées au pH physiologique, se lient raisonnablement avidement aux phospholipides acides par appariement d’ions (19). Outre l’hémoglobine, l’une des protéines les plus abondantes dans les érythrocytes est l’anhydrase carbonique à laquelle certains inhibiteurs à base de sulfonamide, tels que l’acétozolamide et la chlorthalidone, se lient avidement. La cyclosporine et le tacrolimus ont une très forte affinité pour la cyclophilline intracellulaire. Dans ces exemples, la liaison cellulaire est beaucoup plus grande que la liaison aux protéines plasmatiques (ρ > > 1 / fu), de sorte que l’équation   2 se réduit à

La concentration sanguine est maintenant directement proportionnelle à la concentration non liée et insensible aux changements dans la liaison aux protéines plasmatiques, et dans cette mesure, le sang est potentiellement une matrice supérieure au plasma. Cependant, la concentration sanguine est sensible à &#x003c1 ;, qui peut changer et change, par exemple, en raison de la saturation de la liaison sur la plage des concentrations thérapeutiques, au moins pour la cyclosporine (20) glycémie. Dans ces circonstances, il convient de faire preuve de prudence lors de l’interprétation des données sanguines. Ces médicaments présentent également des taux de concentration sanguine-plasmatique élevés. Ceci est évident en divisant Eq.   2 par Eq.   1, ce qui donne

5et réglage ρ > > 1 / fu. Par exemple, pour le tacrolimus, Cb / C   =   10 – 20 et fu   =   0,07 (21,22) à partir de laquelle on voit que lorsque H   =   0,45; ρ   =   300 – 617. Un problème avec la tentative d’utiliser le plasma en tant que matrice analytique pour les études PK et PD avec de tels médicaments est que toute hémolyse introduit des erreurs significatives dans la mesure. En continuant avec le tacrolimus, le calcul montre que si une tolérance de 10% est la limite permise dans l’augmentation de la concentration plasmatique due à l’hémolyse, ceci est atteint quand seulement 0,5% d’hémolyse se produit. C’est l’une des raisons pour lesquelles le sang, plutôt que le plasma, a été utilisé pendant le développement de médicaments, par exemple, du tacrolimus et de la cyclosporine et dans le suivi de leur suivi thérapeutique (23,24). Une autre raison d’utiliser le sang est que la liaison érythrocytaire de ces composés est dépendante de la température (18), de sorte que si l’on souhaite obtenir une estimation de la concentration plasmatique in vivo au moment du prélèvement, l’échantillon sanguin doit être conservé à 37 ° C pendant la séparation du plasma, ce qui crée des problèmes techniques dans la pratique clinique de routine. Le rapport de concentration sang-plasma offre un diagnostic utile pour savoir si la liaison aux protéines plasmatiques ou l’affinité des cellules sanguines en considérant DBS. Ainsi, l’examen de l’équation   5 montre que ce dernier prédomine lorsque Cb / C > 1,5, depuis, pour l’hématocrite normal (0,45), fu × ρ > 2, ou ρ > 2 / fu, à partir de laquelle, lors de la substitution en Eq.   2, on voit que H × ρ est le terme le plus influent dans la relation entre Cb et Cu (fub). Dans cet exemple, cela implique que fu peut varier deux fois plus que ρ avoir le même impact sur Cb pour un Cu donné. En général, le fu ne varie pas d’un facteur 3, et souvent moins, pour les médicaments liés à l’albumine, mais il peut varier davantage pour ceux liés principalement à la glycoprotéine 1-acide (18). Malheureusement, à l’heure actuelle, on ne sait pratiquement rien de l’ampleur de la variabilité inter et intra-sujet dans ρ pour les médicaments. Les facteurs à considérer sont la maladie, l’âge, la génétique, la co-médication et le genre, en plus de la concentration et de la température du médicament. Certains médicaments peuvent être des substrats ou des inhibiteurs de l’un des nombreux transporteurs qui résident dans la membrane érythrocytaire. Clairement, étant donné que fub se rapproche de 1 / (H × ρ) lorsque Cb / C > 2, il est important de définir et de comprendre les sources de variabilité dans ρ pour de tels composés lors de l’application de DBS dans le développement de médicaments. On peut être tenté dans les investigations préliminaires d’utiliser le rapport sang-plasma comme mesure de la variabilité dans &#x003c1 ;. Cependant, pour de tels composés, le rapport se rapproche de H × fu × &#x003c1 ;, qui tend à gonfler l’estimation de la variabilité dans ρ mais pourrait aussi le déguiser, si pour une raison quelconque fu et ρ Une autre considération vient du fait que souvent, avec la disponibilité de dosages très sensibles, qui ne nécessitent que des volumes d’échantillons infimes, le sang est prélevé du talon ou des piqûres au doigt. Cependant, de tels échantillons sont initialement contaminés par du liquide interstitiel qui non seulement dilue le sang mais peut aussi avoir des concentrations de composé qui diffèrent de celles du plasma. Ce problème est surmonté en rejetant le fluide initial recueilli. Même ainsi, le sang capillaire a tendance à refléter plus de sang artériel perfusant le site de prélèvement que le sang veineux qui l’évacue, en particulier lorsque le talon ou le doigt est immergé dans l’eau chaude pour stimuler la circulation sanguine. De plus, ces sites se trouvent à des emplacements différents de ceux des sites habituels d’échantillonnage veineux, avec des différences potentielles de concentration de médicament, étant donné que la concentration dans le sang veineux reflète les événements survenant lors du passage du sang dans le lit tissulaire associé. On s’attend à ce que de telles différences surviennent particulièrement dans les premiers moments suivant l’administration du médicament, avant que l’équilibre de distribution ne soit atteint. Même ainsi, de telles différences sont susceptibles d’être généralement faibles et devraient certainement être pratiquement inexistantes une fois que l’équilibre de distribution du médicament s’est produit. Comme mentionné précédemment, la distribution de médicament entre le plasma et les cellules sanguines prend du temps. Habituellement, cela se produit très rapidement et est peu préoccupant sur le plan pratique, mais il peut parfois l’être. Plus l’affinité des cellules sanguines et la liaison aux protéines plasmatiques sont élevées, et plus la perméabilité de la membrane cellulaire est faible, plus l’équilibre est long. Certes, il faut plusieurs minutes pour que l’équilibre de distribution se produise pour la cyclosporine et les composés apparentés (25), alors que la chlorthalidone prend beaucoup plus de temps, avec une concentration sanguine plusieurs heures après l’administration du médicament (26).En conséquence, lorsque le sang total est la matrice de mesure, de tels retards temporels peuvent avoir un impact sur l’interprétation de PK et PD pour la situation courante dans laquelle la réponse est mieux liée au médicament non lié dans le plasma que dans les cellules sanguines. Cela dépend en grande partie du processus, PK ou PD, qui constitue l’étape limitant le taux sur la période d’intérêt. Dans le cas particulier des inhibiteurs de l’anhydrase carbonique, tels que la chlorthalidone, où l’érythrocyte est l’un des principaux sites cibles, la PD devrait mieux correspondre aux mesures sanguines que plasmatiques, surtout pendant la période où l’équilibre de distribution entre ces sites n’a pas encore été Le choix de la matrice peut influencer la précision de l’estimation de la biodisponibilité. Généralement, l’estimation est considérée comme étant le rapport des AUCs après les administrations extravasculaires et iv (ou après deux administrations extravasculaires lorsque l’intérêt est dans la biodisponibilité relative), en normalisant pour toute différence de dose. Une hypothèse implicite dans cette méthode est la constance de la clairance. Lorsque la liaison des cellules sanguines est saturée suivant l’une ou l’autre ou les deux voies d’administration, la clairance sanguine peut ne plus être constante; beaucoup dépend de l’étape limitant le débit. Lorsque la clairance sanguine est élevée et que la vitesse de perfusion est limitée, la saturation a peu ou pas d’impact sur la clairance, et le rapport entre les ASC du sang fournit une mesure précise de la biodisponibilité. Cependant, lorsque la clairance est faible, la clairance plasmatique est proportionnelle à la clairance fu et sanguine, ce qui est considéré par l’équation   2 comme dépendant de &#x003c1 ;. En conséquence, comme ρ varie avec la concentration dans des conditions de saturation, ainsi la clairance sanguine. Dans ces circonstances, le rapport des ASC du sang ne fournit plus une estimation précise de la biodisponibilité. Le fait que le plasma fournisse une estimation plus précise dépend de la saturation ou non de la liaison aux protéines plasmatiques. Avec la cyclosporine, ρ mais pas fu présente une liaison dépendant de la concentration, et dans ce cas, le plasma est le meilleur choix de matrice pour l’évaluation (27). Le degré d’erreur dans l’estimation de l’utilisation du sang dépend des caractéristiques du médicament, qui peuvent être explorées par simulation et en fonction des aspects pratiques impliqués. Un qualificateur est nécessaire ici. Une méthode pour surmonter le problème de la non-linéarité consiste à rendre les profils de concentration entre les traitements aussi proches que possible, car la non-linéarité de la liaison des cellules sanguines s’applique également aux deux traitements en tout temps, et le rapport AUC méthode s’applique maintenant. En pratique, ceci n’est pas facile à réaliser car il implique une connaissance préalable de la forme du profil et de la biodisponibilité, de sorte que le profil d’entrée d’une administration intraveineuse est approprié, bien que l’utilisation d’un traceur radiomarqué iv, qui se mélange avec ne dérange pas la piscine, suffirait. Une question connexe est l’évaluation de la bioéquivalence. Dans de tels cas, comme le test porte sur la similitude des profils, le sang est sans doute aussi approprié qu’un plasma (27).